目的评价实验室常用的消毒剂对乙型肝炎病毒(HBV)的核酸和表面抗原的作用效果。方法采用悬液法将不同消毒剂与HBV混合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)评价消毒剂对乙肝表面抗原(HBsAg)的作用效果,通过实时荧光定量PCR评价消毒剂对HBV DNA的作用效果。结果对于高浓度的HBV核酸和HBsAg,1%卫可(Virkon)处理1h可使HBV DNA和HBVistusertibsAg变为阴性,含氯消毒剂和75%乙醇仅对低浓度HBV血清有效,而过氧化氢对所有浓度的HBV核酸和HBsAg效果都不明显。结论当实验室发生HBV阳性血清溅洒等生物安全事故时,采用20～40倍体积1%卫可处理1h较为适宜。
目的建立一种基于TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量PCR方法检测人类免疫缺陷病毒(human immaSelleck Trichostatin Anodeficiency virus,HIV-1)感染者外周血中HIV-1 DNA的含量。方法根据HIV-1病毒基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB荧光探针,建立TaqMan-MGB实时荧光定量PCR检测方法和定量标准曲线,优化反应方案,分析方法的灵敏度、准确性、重复性和精密度。采用该方法对20份HIV-1感染者和10份正常人的外周血进行HBI 10773小鼠IV-1 DNA检测分析,并将结果与罗氏HIV DNA检测试剂盒作比较。结果成功建立了检测HIV-1 DNA TaqMan-MGB双标记探针实时荧光定量检测方法。灵敏度 该体系最低检出限可达10拷贝/ml,标准曲线方程为 Y=-3.339X+45.883,R~2=1。准确性 20份HIV-1阳性样本,HIV-1 DNA检出率100.00%,10例HIV-1阴性的健康对照,检测结果全部阴性;该检测结果与罗氏试剂盒检测结果完全一致。