目的 评价双价肺结核疫苗的免疫原性。方法 ESAT6、rv3407、RpfB三种抗原基因融合后(TPA-3Ag)与Ag85A一种抗原基因均用重组人5型腺病毒载体进行表达,按照1∶0.2、1∶1、1∶2、1∶4四种不同滴度配比免疫小鼠。使用酶联免疫吸附实验(ESelleckLISA)进行抗原特异性体液免疫评价,使用酶联免疫斑点法(ELISpot)和细胞内细胞因子染色(ICS)进行抗原特异性细胞免疫评价。结果 双价疫苗均产生体液免疫应答和细胞免疫应答。结论 双价疫苗有提高肺结核保护范围的可能性,可能成为预防结核或者病的新型疫苗。
为研究杆状病毒GP64蛋白在感染宿主过程中的表达情况,通过克隆构建含GP64基因的重组质粒,在CHO-S细胞表达重组GP64蛋白,利用野生型杆状病毒免疫BALB/c小鼠血清,筛选出重组GP64蛋白的单克隆抗体。结果表明OH-FMK Caspase Inhibitor VI细胞系,构建出正确的GP64重组质粒,成功表达出GP64蛋白,筛选出1株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞5B1;单克隆抗体亚类鉴定结果显示,单抗亚类为Ig G2b,轻链类型为κappa;IFA和Western-blot结果显示筛选出的GP64单克隆抗体可以与杆状病毒及GP64蛋白发生特异性结合。结论,GP64蛋白的单克隆抗体制备成功。