18周观察大鼠肝脏中肿瘤大小和数量、肝功能指标。结果发现Doxil联合CL-LIP给药后大鼠肝癌肿瘤体积缩小、数目减少,DEN导致的肝损伤得到改善。HPLC-MS检测结果明确了Doxil能够在肝癌大鼠中富集,进一步证实了第一部分中Doxil在正常大鼠肝脏中富集的结果。以上结果表明,Doxil在肝脏富集及联合CL-LIP给药可抑制肝癌发展。接下来,我们探讨了其作用机制Selleck AZD1080。对上述各处理组大鼠肝脏进行免疫组化染色发现,联合给药可有效清除肝脏中巨噬细胞。巨噬细胞死亡后,释放出的化疗药物可杀伤周围肿瘤细胞,Tunnel染色结果表明联合给药诱导肿瘤细胞凋亡增多。在DEN诱导肝癌过程中M2巨噬细胞表达增多,且肝癌细胞与M2巨噬细胞共培养可促进其增殖。通过对DEN和DEN+CL-LIP大鼠肝脏中TNFα检测,发现TNFVS-4718α表达下调。以上结果提示在DEN诱导的大鼠肝癌模型中,Doxil与CL-LIP联合给药可利用巨噬细胞对脂质体的吞噬作用及CL-LIP对巨噬细胞的特异性杀伤作用(第一部分已证实),一方面清除肝脏中M2型巨噬细胞,减少TNFα的分泌,改善肿瘤微环境;另一方面,巨噬细胞死亡后,释放出的化疗药物可杀伤肿瘤细胞,从而提高对大鼠肝癌治疗作用。第三部分阿PLX3397订单霉素和氯膦酸二钠脂质体联合预防肝癌发生及机制探讨为了探究Doxil与CL-LIP联合在肝癌发生中的预防作用,我们构建了DEN诱导8周大鼠肝癌发生模型,首先筛选出Doxil在抑制大鼠肝癌发生的有效剂量(2mg/kg),再在大鼠DEN诱癌8周即肿瘤形成前期给予随机分组和相应处理生理盐水(Control组)、CL-LIP(CL-LIP组)、Doxil(Doxil组)、Doxil与CL-LIP(Doxil+CL-LIP组)。