(4)采用CCK8检测细胞活力实验、琼脂糖克隆形成实验、细胞周期、和细胞侵袭实验,探究MXRA7对NB4细胞增殖活力、周期分布、侵袭能力以及与侵袭相关的基质金属蛋白酶表达的影响。(5)采用流式细胞术检测过表达和敲低MXRA7的NB4细胞的凋亡变化和对化疗药物甲氨蝶呤和阿糖胞苷诱导后的凋亡差异,Western blot实验检测凋亡相关蛋白的表达情况Protein Tyrosine Kinase抑制剂。(6)采用流式细胞术检测急性早幼粒细胞NB4向粒系细胞分化的表面标志分子CD11b的表达情况,瑞氏-吉姆萨染色和NBT氧化还原实验研究MXRA7对NB4细胞分化的影响。(7)Western blot检测全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化过程中MXRA7对融合蛋白PML-RARα、PML和RARα表达的影响;实时WZB117生产商荧光定量PCR检测MXRA7对髓系细胞分化过程中起重要作用的转录因子CEBP家族成员表达的影响。(8)体内实验通过NOD-SCID免疫缺陷小鼠构建急性早幼粒白血病小鼠模型尾静脉注射MXRA7敲低的NB4细胞和对照细胞,观察小鼠的生存时间、体重变化以及小鼠股骨全骨髓细胞中白血病细胞的比例及数量变化。结果(1)通过BloodPF-573228 IC50Spot和Leukemia Gene Atlas两个数据库分析均发现,MXRA7在t(15;17)染色体异位的急性髓系白血病,即急性早幼粒白血病中表达异常升高。(2)通过实时荧光定量PCR和Western blot实验结果发现,MXRA7的mRNA和蛋白在AML-M3、B-ALL和T-ALL病人骨髓中的表达量都高于正常供体的骨髓;MXRA7在AML、B-ALL和T-ALL的细胞系中表达也有高表达。