2 干预实验成年雄性大鼠48只,随机分为8组假手术组、KOA组、KOA+Piezo1慢病毒过表达组、KOA+Piezo1慢病毒沉默

2.干预实验成年雄性大鼠48只,随机分为8组假手术组、KOA组、KOA+Piezo1慢病毒过表达组、KOA+Piezo1慢病毒沉默组、KOA+Piezo1抑制剂组、KOA+推拿组、KOA+Piezo1慢病毒过表达+推拿组及KOA+Piezo1慢病毒过表达+JAK2抑制剂组。造模7天后行推拿干预、Piezo1特异性抑制剂干预、JAK2特异性抑制剂干预等Selleck Caspase 抑制剂,计算Mankin’s评分和TUNEL染色阳性区域,Western Blot检测关节软骨Piezo1和p-JAK2的表达水平。结果1.大鼠膝关节骨性关节炎动物模型的建立及Piezo1、JAK2、Caspase3与软骨细胞凋亡的相关性(1)随着时间的延长,关节软骨TUNEL染色的阳性区域也随之增加;(2)随着病程的进展,KOATubastatin A细胞系大鼠的Mankin’s评分逐渐升高,提示大鼠膝关节的病理性破坏程度逐渐加重,KOA逐渐进展;(3)随着骨关节病变的进展,KOA大鼠膝关节软骨内Piezo1蛋白的表达也随之升高,且与之伴随的是凋亡相关蛋白Caspase3的升高,并伴有JAK的激活。2.推拿对大鼠膝关节骨性关节炎的治疗作用以及分子机制研究(1)Piezo1蛋白的INCB018424分子量过表达相较于单纯KOA组关节的损伤程度严重,而Piezo1蛋白的沉默、Piezo1抑制剂以及JAK2磷酸化抑制剂AG490能够逆转和减轻关节的损伤程度;同时通过推拿的干预,KOA关节的损伤也明显减轻。KOA+Piezo1过表达组和KOA+Piezo1过表达+推拿组的关节软骨病理性评分比较,结果显示,推拿干预能够明显减轻关节软骨的损害程度。通过观察各组关节软骨切片TUNEL染色的结果,也发现了相同的趋势。

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