方法建立裸鼠鳞状细胞癌荷瘤模型,随机均分成4组:对照组、放疗组(RT)、凡德他尼组、联合治疗组(凡德他尼+RT)观察肿瘤细胞大体增殖情况,免疫荧光法检测肿瘤组织CD34、γ-H2AX表达、细胞增殖相关抗原Ki67,计数微血管密度(microvessel density,MVD),细胞内γ-H2AX荧光焦点平均值以以及及肿瘤细胞增殖率。结果 VEGF及EGFR抑制药同步联合放疗组比单药治疗及单纯放疗明显延迟肿瘤细胞增殖时间,同时CD34、γ-H2AX、Ki67免疫荧光染色显示明显减少微血管密度,增加肿瘤细胞内DNA双链断裂程度,并降低肿瘤细胞增殖率(P<0.05)。结论 VEGF及EGFR抑制药与放疗AC220DMSO溶解度同步,从机制上抑制肿瘤新生血管形成,加重肿瘤细胞DNA损伤,抑制肿瘤细胞增殖,从而增加放疗疗效。”
“为构建用于筛选的新型鸡痘病毒载体,采用染色体步移技术对鸡痘病毒282E4株TK基因的下游序列进行测序,并结合扩增出的左右同源重组臂TKL、TKR片段、启动子、MCS及终止信号构建出三表trans-isomer研究购买达盒穿梭载体pTKE3。采用基因工程技术将绿色荧光蛋白EGFP基因克隆入3个启动子的下游,构建出pTKE3-A、pTKE3-B、pTKE3-C验证表达盒质粒。结果显示,构建的3个验证质粒分别与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,均可在转染12h后观察到绿色荧光。结果表明,构建的三表达盒载体均可成功表达外源基因,这为进一步构建多价重组鸡痘病毒活载体疫苗奠定了基础。