方法:体外分离培养星形胶质细胞,分为对照组、活化组、抑制组。通过光学显微镜及免疫荧光化学观察各组细胞的形态变化;应用半定量RT-P

方法:体外分离培养星形胶质细胞,分为对照组、活化组、抑制组。通过光学显微镜及免疫荧光化学观察各组细胞的形态变化;应用半定量RT-PCR方法分析各组细胞间胶原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mRNA及NGF mRNA、IL-6 mRNA表达变化;用ELISA法检测各组细胞上清液中不同时间点(6h,24h,48确认细节h,72h)NGF、IL-6的含量。结果:活化组与对照组比较,细胞胞体变大,GFAP荧光增强;RT-PCR示GFAP mRNA、NGF mRNA、IL-6 mRNA表达均明显增高,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);ELISA法检测示星形胶质细胞活化后NGF分泌量在活化后24小时达到高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);抑制剂活化后48小时IL-6的含量达到高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);应用抑制剂Genistein干预后,与活化组相比,抑制组细胞胞体变小,星形胶质细胞活化被抑制,GFAP mRNA表达下降,NGF mRNA、IL-6 mMRA表达亦下降,与活化组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:星形胶质细胞活化后NGF、IL-6表达均上调,但NGF表达时间早于IL-6表达时间,表明在星形胶质细胞活化的早期,可能其神经保护作用占主导,而后期其神经毒性作用逐渐明显;Genistein能抑制星形胶质细胞活化,使NGF、IL-6表达下调。”
“基质金属蛋白酶(MMP)是一类含Zn2+的降解细胞外基质(ECM)的内切蛋白水解酶家族,MMP的表达和酶活性受组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)、酶原活化等多种因素调节,多种因素可导致MMP和TIMP的平衡失调。

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