方法:应用DNA重组技术构建AR与GFP的融合基因(AR-GFP),将AR-GFP插入pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体中,通过磷酸钙共沉淀转染HEK293细胞,倒置荧光显微镜评价转染效率,Western blotting技术检测AR基因在转染细胞中的整合及表达,分光光度法(UV法)测定AR表达活性,用公认的AR抑制剂(ARI)反证寻找更多活性AR的存在。结果:荧光显微镜对转染细胞的观察及Western blotting结果证实AR-GFP融合蛋白在HEK293细胞中表达,UV法测活、ARI抑制试验均未证实其生物学活性。结论:转染的HEK293细胞可成功地表达AR-GFP融合蛋白,但不能成为ARI真核细胞筛选模型。”
“喹诺酮类化合物是一类临床广泛使用MK-1775体外的广谱、高效、低毒抗感染药物。随着耐药菌的迅速增加,抗感染治疗正面临重大挑战。因此,对喹诺酮类化合物进行结构修饰以获得活性更强、抗菌谱更广、毒性更小的抗感染药物仍是抗菌药研究领域的重要课题之一。综述近年来喹诺酮类化合物结构修饰及抗菌活性研究的新进展。”
“目的通过观察缺氧致大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)丝氨酸/苏Smad cancer氨酸蛋白激酶3(Akt3)mRNA及其蛋白表达水平变化与低氧PASMC增殖的关系,探讨Akt3在低氧肺血管重建中的调控作用。方法组织块法培养PASMC。采用半定量RT-PCR技术检测常氧组(N组)和低氧2、8、12、24h组Akt3基因mRNA表达水平;采用Westernblot技术检测相应蛋白表达水平。采用MTT法、3H-TdR掺入法检测PASMCs增殖改变。结果低氧诱导PASMCs不断增殖。