00±1.13;IP组:32.83±1.81;BI组:24.30±1.47。IR、IP及BI组较Sham组均有明显的心肌梗死(P selleck < 0.01),IP、BI组较IR组心肌梗死面积明显缩小(P < 0.01),且BI组较IP组梗死面积缩小更明显(P < 0.05);(2)心肌酶学:缺血前5min,sham组:CK 2125.33±148.35,LDH 173.58±16.85; IR组:CK 2151.42±88.86,LDH 176.25±15.95;IP组:CK 2088.67±68.86,LDH 172.33±14.21;BI组:CK

2104.00±78.27,LDH 168.50±15.68。缺血30min , sham组: CK 2088.42±69.32 , LDH 176.42±15.79;IR组:CK 3617.50±97.43,LDH 466.50±26.42;IP组:CK 2559.00±103.31,LDH 332.08±20.68;BI组:CK 2459.83±92.35,LDH 310.25±23.16。再灌注2h,sham组:CK 2148.67±63.53,LDH 177.42±16.94;IR组:CK 4676.33±78.61,LDH 591.17±25.67;IP组:CK 3011.83±79.98,LDH 362.08±12.99;BI组:CK 2936.58±80.08,LDH 339.50±24.96。IR、IP及BI组较Sham组均能明显升高心肌酶(P Selleckchem LBH589 < 0.01),IP、BI组各时间点CK和LDH均较IR组明显降低(P < 0.01),且BI组较IP组降低更明显(P < 0.05);(3)NF-κB蛋白表达评分:sham组:0.73±0.32;IR组:3.51±0.58;IP组:2.62±0.69;BI组:2.01±0.62。IR、IP及BI组较Sham组NF-κB蛋白表达均明显增加(P < 0.01);IP组、BI组NF-κB蛋白表达均较IR组显著较少(P < 0.01),且BI组较IP组更明显(P < 0.05)。(4)TNF-α蛋白表达评分:sham组:0.81±0.30;IR组:4.06±0.59;IP组:3.01±0.48;BI组:2.60±0.27。IR、IP及BI组较Sham组TNF-α蛋白表达均明显增加(P < 0.01);IP组、BI组TNF-α蛋白表达均较IR组显著较少(P

< 0.01),且BI组较IP组更明显(P < 0.05)。 结论心肌缺血再灌注可以导致心肌组织的再灌注损伤,而缺血预适应及灯盏花素联合预适应均显著缩小心肌梗死面积,降低心肌酶,减少心肌细胞内TNF-α、NF-κB蛋白的表达。其对缺血再灌注损伤心肌的保护作用机制可能与减轻再灌注心肌的炎性损伤有关。
目的血管外膜成纤维细胞(adventitial AP24534订单 fibroblasts,AFs)表型转变在血管重塑、纤维化过程中发挥重要作用,我室前期研究发现,尾加压素II(UrotensinII,UII)能够促进血管外膜成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转变、促进胶原合成,其机制尚待阐明。已知转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是促进成纤维细胞表型转化和胶原合成的重要活性因子,为此,本工作通过体外培养大鼠血管外膜成纤维细胞,观察尾加压素II刺激后转化生长因子β1表达的变化,以及UII、TGF-β1处理后α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth

muscle actin,α-SM–actin)mRNA及蛋白表达的变化,探讨UII对TGF-β1表达的影响以及两者在促血管外膜成纤维细胞表型转化中的相互作用及其机制。 方法(1)用贴块法培养大鼠胸主动脉血管外膜成纤维细胞,取3~5代细胞用于实验,以1×10-10～1×10-7mol/L尾加压素II刺激血管外膜成纤维细胞24h,或以1×10-8mol/L尾加压素II刺激血管外膜成纤维细胞8h、12h、24h、48h,或以1×10-7mol/L尾加压素II受体阻断剂SB-710411分别作用24h、48h,提取上清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测各组上清液中TGF-β1蛋白含量;(2)将细胞分为单纯培养基对照组、UII(10-8 mol/L)组、TGF-β1(20ng/mL)组、UII(10-8 mol/L)+TGF-β1(20ng/mL)、UII(10-8 mol/L)+ TGF-β1特异性中和抗体(20ug/ml)组以及TGF-β1(20ng/mL)+SB-710411(10-7mol/L)组,培养24h后,用蛋白免疫印迹试验(Western Blotting)及实时定量PCR(Real-time PCR)方法分别检测α-平滑肌肌动蛋白及mRNA表达。计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,两组间均数比较用t检验,多组间均数比较用单因素方差分析,P0.