05)。2ALP比活性测定:OM组和SIM组显著高于CM组,与相比,SB+SIM组显著低于SIM组(P
目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)在脂多糖(LPS)诱导大鼠滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast,SF)合成炎性因子IL-1β、MMP3中的作用。方法:采用酶消化法分离获得大鼠SF,体外培养并鉴定,分别作为空白对照组、与不同浓度LPS共培养、以SB203580预处理后与LPS共培养,24h后免疫化学染色、RT-PCR分别检测通路活化水平和炎性因子蛋白及m RNA表达量。结果:LPS可刺激SF使IL-1β、MMP3蛋白和m RNA表达上调,表达量随LPS浓度增高而增加(与对照组相比P
低剂量顺铂可通过诱导p21与p16表达而诱导肿瘤细胞早衰,但其机制不明。本研究探讨了低剂量顺铂诱导的He

La细胞衰老过程中p21与p16的上调机制。低剂量顺铂(4μmol/L)处理He La细胞后,DNA甲基转移酶DNMT1蛋白水平降低;p21与p16启动子甲基化水平降低,二者mRNA及蛋白质水平升高;顺铂对DNMT1蛋白水平的降低作用与其激活p38MAPK有关,用SB203580抑制p38MAPK可部分逆转顺铂对DNMT1蛋白水平以及p21与p16启动子甲基化的降低作用,从而部分逆转顺铂对p21与p16表达的诱导;抑制p38MAPK也可部分逆转低剂量顺铂诱导的He La细胞早衰。上述结果表明,低剂量顺铂可通过p38MAPK信号通路下调p21与p16启动子甲基化水平,进而上调二者的表达。这些结果为解析低剂量顺铂诱导肿瘤细胞早衰的信号转导机制提供了实验依据。
目的明确缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)调控的卵巢癌细胞迁移中的作用及其机制。方法采用免疫组化分析HIF-1α在卵巢癌组织中的表达水平;将HIF-1αsiRNA转染SKOV3卵巢癌细胞,分别用SDF-1α和SDF-1α+SB203580处理,用RT-PCR及western 此网站 blotting分析HIF-1α、p38MAPK的表达水平。结果免疫组化分析表明,HIF-1α在卵巢癌组织中高表达,同时SDF-1α可明显诱导HIF-1α的mRNA及蛋白水平的表达;当用HIF-1αsiRNA转染后,细胞中HIF-1α的表达水平明显下降。当用通路抑制剂SB203580处理后,SDF-1α诱导的HIF-1α水平明显降低。结论 无 SDF-1α可通过p38MAPK-HIF-1α通路来调控卵巢癌细胞的迁移。因此,该研究将为卵巢癌的防治提供新的研究方向。
目的研究脂多糖(LPS)所致炎症与脑细胞色素P4502E1和CYP2E1之间的相互影响。方法采用具有胆碱能神经元特征的IMR-32人神经母细胞瘤细胞系,分别给予低剂量(0.1

mg·L~(-1))和高剂量(1.0 mg·L~(-1))LPS处理24

h,检测LDH和SOD活性。在LPS处理前45 min,分别加入p38抑制剂SB203580和ERK抑制剂U0126处理IMR-32细胞,观察MAPK信号系统对神经元CYP2E1表达的影响。采用具有多巴胺能神经元特征的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞系建立高表达CYP2E1细胞系,并与正常SH-SY5Y细胞同时给予低剂量(0.1 mg·L~(-1))和高剂量(1.0 mg·L~(-1))LPS处理24 h后检测LDH和SOD活性。结果与对照组相比,高剂量LPS处理IMR-32细胞,SOD的活力下降15.0%(P<0.01),LDH上升1.38倍(P<0.01),蛋白水平升高1.19倍(P<0.05)。p38和ERK抑制剂可拮抗高剂量LPS对CYP2E1的诱导作用。低剂量LPS处理CYP2E1高表达SH-SY5Y细胞,LDH的升高幅度较非高表达的对照组上升了1.28倍(P<0.01),SOD活力下降幅度增加了3.53倍(P<0.01);高剂量LPS使得CYP2E1高表达SH-SY5Y细胞LDH的升高幅度较非高表达的对照组上升了1.54倍(P<0.01),SOD活力下降幅度增加了2.17倍(P
目的探索钙卫蛋白(S100A8/A9)、Toll样受体4(TLR-4)及丝裂原活性的蛋白激酶(MAPK)信号传导途径在动脉血栓中的表达及与环氧化酶-2(COX-2)的关系。方法 INK1197核磁共振 24只SD大鼠分为实验组和对照组,实验组利用FeCl_3溶液建立颈动脉血栓大鼠模型,对照组注射等量生理盐水。分别于造模后第1、3、7、14日分批处死2组大鼠,每次每组3只。利用ELISA检测大鼠外周血S100A8/A9水平。采用Western blotting对SD大鼠外周血白细胞中COX-2、p-p38 MAPK、TLR-4水平进行检测,并分析各因子水平之间的相关性。利用MAPK抑制剂SB203580对模型大鼠进行干预,观察对COX-2蛋白水平的影响。结果实验组大鼠外周血S100A8/A9水平在造模后第7日达到最高值,第14日回落,且均显著高于对照组相应时间点水平(P
P38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(MAPKS,mitogen-activated kinase)的一个亚类,有关P38MAPK信号通路在肾缺血/再灌注损伤中与细胞凋亡关系的研究国内外很少。本研究通过检测肾缺血/再灌注不同时间点细胞凋亡及P38MAPK的变化,来揭示肾缺血/再灌注损伤的病理机制。 一、材料和方法 1.