将3组细胞接种于裸鼠皮下,建立食管癌裸鼠移植瘤模型,每组11只,喂养30 d后处死裸鼠,剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积并称取瘤体质量,采用Western blot检测肿瘤组织中P21和P53蛋白的表达情况。结果 与对照组和shRNA-NC组相比,shRNA-ECT2组细胞中ECT2 mRNA和ECT2、CyclinD1、CDK2Mitomycin C solubility dmso蛋白的表达水平、细胞增殖活力和S期细胞百分比均明显降低,G0/G1期细胞百分比明显升高(P<0.05);与对照组和shRNA-NC组相比,shRNA-ECT2组移植瘤体积和瘤体质量均减小,而P21和P53蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05)。结论 shRNA沉默ECT2可抑制食管癌EC109细胞分子量增殖和成瘤能力,其作用机制可能与促进P21和P53蛋白的表达有关。
目的 研究非同源末端连接修复基因Ligase4缺失对芹菜素(APG)抑制TK6细胞增殖作用的影响。方法 采用CCK8方法检测APG和阳性药依托泊苷(ETP)对TK6细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测APG对TK6细胞周期和凋亡selleck products的影响;利用免疫荧光实验分析APG对野生型(WT)和DNA损伤修复缺陷的Ligase4-/-细胞的DNA损伤作用。结果 APG对TK6细胞的增殖抑制作用呈现剂量依赖性;APG能将TK6细胞阻滞在G2/M期并诱导TK6细胞凋亡;经80μmol·L~(-1)APG处理细胞后,Ligase4-/-型细胞的γ-H2AX foci相对于WT细胞明显增加,在6 h达到峰值(P<0. 05)。