(3)采用Transwell细胞侵袭实验检测MK2206抑制浸润性膀胱癌细胞株UMUC3的侵袭能力,并通过免疫印迹方法检测与侵袭有关的上皮间充质转化(EMT)中各指标snail,slug及ZEB1的表达水平变化,探讨MK2206抑制细胞侵袭能力的作用机制。(4)采用膀胱癌细胞株RT112建立膀胱癌动物模型(小鼠皮下肿瘤模型),研究各种药物的体PF-02341066 花费内治疗肿瘤的效果；采用腹腔注射的方法将药物注射到小鼠体内并分组,对照组(DMSO)、CDDP组、MK2206组、MK2206+CDDP组,观察各组中对膀胱癌皮下肿瘤生长的影响情况,并通过免疫组织化学染色的方法检测四组动物模型中的皮下肿瘤标本的Ki-67表达,分析各组药物对肿瘤细胞增殖的抑制情况。结果(1)蛋白免疫印迹还有检测在肌层浸润性膀胱癌细胞株中(253J,J82,T24, UMUC3)磷酸化Akt及下游的效应分子表达增强,而在非肌层浸润性膀胱癌细胞株中(RT112,RT4)磷酸化Akt及下游的效应分子无表达或弱表达。(2)MTT细胞活性实验检测MK2206(500nM)联合CDDP可以提高CDDP诱导的对肿瘤细胞毒性作用,从而通常增加膀胱癌肿瘤细胞对CDDP的敏感性。蛋白免疫印迹检测到联合CDDP治疗,MK2206(500nM)可以增强CDDP引导的肿瘤细胞凋亡效应,而这种凋亡效应依赖于磷酸化Akt及其下游效应分子表达水平的抑制。(3)MK2206(500nM)抑制磷酸化Akt及下游效应分子表达水平,还可以抑制UMUC3的侵袭能力,并且抑制侵袭相关蛋白snail,slug及ZEB1的表达水平,这些指标也与化疗敏感性密切相关。