第三部分协同致死效应机制的初步探索目的研究协同致死效应发生的机制和细胞死亡方式。方法(1)利用基因芯片分析软件对来自公共数据库GEO的芯片表达谱数据进行进一步的生物信息学分析,通过KEGG/GO通路分析、分子网络分析和蛋白互作分析,进一步了解JQ-1影响的生物学过程;(2)采EPZ004777核磁用生物信息学工具了解叶酸、嘌呤和嘧啶代谢途径,并通过TCGA数据库明确代谢途径中关键基因在胰腺癌和癌旁组织中的表达情况及与胰腺癌预后的关系;(3)采用荧光定量PCR检测嘌呤嘧啶和叶酸代谢过程涉及的基因在药物处理后的变化情况;(4)采用Western 无Blot和免疫荧光检测细胞死亡相关蛋白的变化情况,采用细胞死亡抑制剂明确具体的死亡方式。结果(1)基因芯片的分析结果表明,JQ-1可以影响嘌呤和嘧啶代谢过程,而DHFR可以通过调控叶酸合成影响嘌呤和嘧啶的代谢,因此我们提出JQ-1和MTX可能影响叶酸Z-DEVD-FMK生产商、嘌呤和嘧啶的合成引起协同致死效应;(2)通过数据库分析得知叶酸、嘌呤和嘧啶代谢途径在胰腺癌中是活化的,其中一些基因与胰腺癌的预后相关。(3)MTX可以引起TYMS、GART、DHFR和MTR等基因的上调,联合JQ-1后上调效果消失,从而引起协同致死效应;(4)发生协同致死的死亡方式是程序性细胞坏死,自噬也可能在其中发挥重要作用。