结论晚期胰腺癌的核心病位在脾,脾、胃为病多见于南方,肝、胆、肾、肺为病多见于北方;脾虚(脾气虚)与气滞是发病的核心病机,气滞、气虚病机特点多见于南方,北方病机特点在此基础上又表现为湿、血瘀、阳虚、寒、夹痰、夹热;晚期胰腺癌最常用方为四君子汤、异功散、六君子汤、香砂六君子汤的加减,核心处方用药为白术、茯苓、陈皮、鸡内金、黄芪、半夏、白芍、山药、麦芽;治法上,南E7080订单方、北方均注重益气健脾、理气消食,但北方又注重清热利湿、化痰散结、活血化瘀;“三因制宜”学说在肿瘤临床辨治中的指导作用及其合理性,填补了晚期胰腺癌方证特征地域差异研究的空白。3.基于138例患者的前瞻性临床研究结果显示组别是影响胰腺癌生存的独立因素(P<0.05)。相较于西医组,中西医联合治疗可延长晚期胰腺癌患者总生存期(390.0更多0天vs 340.00天,P=0.0485),组间差异有统计学意义(P<0.05)。分层分析结果显示中西医联合治疗可延长病理分级为高中分化的患者总生存期(408.00天vs228.00天,P=0.0232)、分期为Ⅳ期的晚期患者总生存期(408.00天vs 308.00天,P=0.0370)、有区域淋巴结转移的患者总生存期(423.寻找更多00天vs 349.00天,P=0.0297)以及无确诊后治疗史的患者总生存期(390.00天vs255.00天,P=0.0412),组间差异均有统计学意义(P<0.05)。中西医联合治疗后肿瘤标志物CA50降低,组内差异有统计学意义(P<0.05)。中西医联合治疗组患者神疲乏力、恶心呕吐、疼痛、失眠症状改善优于西医组。中西医联合治疗能够改善患者的情绪功能、认知功能、总健康状况、疲乏、恶心呕吐、疼痛、失眠症状。

目的探讨胃癌中医证型与现代分子分型的相关性,以期为胃癌中医临床辨证提供参考与依据。方法以”胃癌”、”中医”、”证型”、”基因”、”分子分型”等关键词,检索2000~2016年的国内医学期刊和学位论文,收集含辨证分型具体病例资料的文献28篇,总结胃癌证型与分子分型相关性。结果中医的”实邪”越盛,浸润转移相关基因阳性表达率越高,具有较高的浸润转移风险,但有待Galunisertib进一步研究证实;结论邪气强盛程度与浸润转移风险正相关;现代胃癌中医辨证体系逐渐完善,已经深入到分子基因水平,不同分子分型所对应的中医证型有所差异,但尚需进一步证实;本文提出了建设”胃癌中医证型数据库”的设想,运用现代科技和互联网进行组织、整合、数据分享和反馈等步骤,以期为胃癌中医辨证积累数据,更好地发挥中医药在胃癌多学科综合治疗中的特色AP26113半抑制浓度与优势。
目的探讨胃癌的主要中医病机特征与治则,从免疫检查点PD-1/PD-L1免疫通路探讨中药抑制胃癌的机制。方法根据中医基础理论搜索整理相关文献,分析胃癌的主要中医病机特征与治则,了解PD-1/PD-L1研究现状,从免疫检查点PD-1/PD-L1免疫通路探讨中药抑制胃癌的机制。结果胃癌以”脾胃虚寒、气滞血瘀”为主要病机特征,针www.selleck.cn/products/icg-001.html对其主要病机特征,治则为”健脾温胃,理气活血”。免疫检查点PD-1/PD-L1及相关免疫通路在胃癌发生发展中起重要作用,研究免疫检查点抑制剂成为了近几年治疗胃癌的热点,既往基础研究证实中药能通过诱导凋亡、去甲基化及抑制新生血管生成与癌基因表达等作用发挥抗胃癌疗效。结论中药可能通过调控免疫检查点PD-1/PD-L1免疫通路及相关细胞因子水平而起到抑制胃癌的作用。
目的探讨肠型胃癌和弥漫型胃癌的临床特点及预后。

LL-37未影响TUBB1 mRNA水平在SW620和HT-29细胞的表达水平,LL-37在5μM明显抑制了TUBB3在SW620和HT-29细胞的表达水平。4.转染TUBB3过表达慢病毒组TUBB3 mRNA表达水平明显增加,无论是否暴露于LL-37转染TUBB3过表达慢病毒组明显增加了SW620细胞迁移性。5.Ⅱ期结肠癌组织表达Cathelicidin较正常PD98059半抑制浓度肠组织中表达明显降低,其他各期组织间无明显差异。正常肠组织及各期结肠癌组织中均可见P2RX7 mRNA和FPRL1mRNA的表达,各组间表达无差异。6.P2RX7的拮抗剂KN62逆转了LL-37对SW620细胞迁移的抑制,但FPRL1的拮抗剂WRW4并不能逆转这种抑制,KN62还能减轻LL-37对SW620细胞骨架的破坏。瞬时转染P2RAZD1208临床试验X7 shRNA明显减少P2RX7 mRNA,转染P2RX7 shRNA组可以使LL-37(5μM)降低的TUBB3mRNA表达水平再次升高。同样,P2RX7的拮抗剂KN62也可以阻止LL-37介导的TUBB3 mRNA表达水平的抑制。7.建立结肠癌肝肺转移裸鼠模型。将裸鼠分2组,同样方法于鼠尾静脉分别注入HA-AAV和CAMP-HA-GDC-0068临床试验AAV,每组再各分2组,同样方法于鼠尾静脉分别注入P2RX7的拮抗剂KN62及对照组。KN62逆转了Cathelicidin过表达组肝、肺组织的细胞角蛋白18和角蛋白20的减少,且KN62逆转了Cathelicidin过表达组肝、肺组织TUBB3mRNA的表达下降。8.LL-37可以增加miR200c-3p在SW620和HT-29细胞的表达。转染P2RX7 shRNA可以逆转LL-37介导的miR200c-3p增加。

上皮性卵巢癌组趋化因子CCL23受体CCR1免疫组化提示CCR1在正常卵巢生发上皮(OSE)呈阴性表达,而在60例Ⅲ/Ⅳ期上皮性卵巢癌组原位病灶中阳性表达较40例Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌明显增强。结论 CCL23-CCR1趋化因子轴可能在上皮性卵巢癌疾病进展中发挥作用。
目的研究胸苷激酶1(thymidine kina购买抑制剂se 1,TK1)与卵巢癌耐药性之间的关系。方法运用GEPIA在线工具分析TK1在正常卵巢组织与卵巢癌组织中的表达差异,运用kaplan-meier plotter分析卵巢癌患者关于TK1的总生存曲线;基于GEO数据库分析TK1在顺铂敏感性与顺铂耐药性的卵巢癌细胞株中的表达差异。综合运用基Nutlin-3 IC50因互作分析、基因通路富集和文本挖掘、miRNA-mRNA相互作用分析等生物信息学方法进一步证明TK1调节卵巢癌耐药性及探索其内在机制。结果卵巢癌组织中的TK1表达明显高于正常卵巢组织,高表达TK1与卵巢癌患者低生存率有关,顺铂耐药的卵巢癌细胞株TK1表达明显高于顺铂敏感的卵巢癌细胞株,与THSP990K1具有高度关联性的基因大部分与卵巢癌耐药性有关;利用基因通路富集对与TK1相关联的基因分析发现,代谢相关通路程度最高;文本挖掘显示,细胞周期、细胞增殖、S期、入胞、磷酸化等生物过程与TK1蛋白、卵巢癌、肿瘤耐药性具有明显的关联性;miRNA-mRNA互作分析发现,靶向于TK1的11个miRNA皆与卵巢癌耐药性或其他肿瘤耐药性相关。结论高表达TK1与卵巢癌的耐药性相关。

第三部分协同致死效应机制的初步探索目的研究协同致死效应发生的机制和细胞死亡方式。方法(1)利用基因芯片分析软件对来自公共数据库GEO的芯片表达谱数据进行进一步的生物信息学分析,通过KEGG/GO通路分析、分子网络分析和蛋白互作分析,进一步了解JQ-1影响的生物学过程;(2)采EPZ004777核磁用生物信息学工具了解叶酸、嘌呤和嘧啶代谢途径,并通过TCGA数据库明确代谢途径中关键基因在胰腺癌和癌旁组织中的表达情况及与胰腺癌预后的关系;(3)采用荧光定量PCR检测嘌呤嘧啶和叶酸代谢过程涉及的基因在药物处理后的变化情况;(4)采用Western 无Blot和免疫荧光检测细胞死亡相关蛋白的变化情况,采用细胞死亡抑制剂明确具体的死亡方式。结果(1)基因芯片的分析结果表明,JQ-1可以影响嘌呤和嘧啶代谢过程,而DHFR可以通过调控叶酸合成影响嘌呤和嘧啶的代谢,因此我们提出JQ-1和MTX可能影响叶酸Z-DEVD-FMK生产商、嘌呤和嘧啶的合成引起协同致死效应;(2)通过数据库分析得知叶酸、嘌呤和嘧啶代谢途径在胰腺癌中是活化的,其中一些基因与胰腺癌的预后相关。(3)MTX可以引起TYMS、GART、DHFR和MTR等基因的上调,联合JQ-1后上调效果消失,从而引起协同致死效应;(4)发生协同致死的死亡方式是程序性细胞坏死,自噬也可能在其中发挥重要作用。

为了上调和下调WISP-2或PPARγ的表达,用携带质粒为WISP-2或PPARγ的过表达(OE)或敲除(shRNA)的慢病毒转染培养的软骨细胞。72小时后,收集细胞进行后续实验。为探讨WISP-2对细胞凋亡的影响,对转染了WISP-2shRNAs的软骨细胞在转染72h后进行了200μg/ml的AGE处理以诱导凋亡。2.5 RT-qPCR从软骨细胞中提取总RNA,反转录成cDNA。RT-q点击此处PCR引物序列见文中表1。扩增条件为扩增条件为首先在94℃保温5min,然后在94℃保温10s/60℃保温20s/72℃保温30s模式下进行40次循环,72℃保温2.5min,40℃保温1.5min,从60℃融化至94℃,1℃/s,mRNA水平归一为β-actin,用2-ΔΔCt法计算相对mRNA水平。2.6蛋白印迹(Western blot)Western bl并且ot检测WISP-2、PPARγ、Zfp423和凋亡相关蛋白的蛋白水平。用RIPA裂解缓冲液提取总蛋白,用BCA蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度。通过凝胶电泳分离等量蛋白质,用ECL底物检测靶条带。利用凝胶图像处理系统(gel-Pro分析仪软件)分析谱带的光密度。2.7 TUNEL检测;免疫荧光;MTT检测;(Annexin V&PI)双染色法流式细胞术;HoechstC188-9细胞系染色。按常规实验方法进行,论文中有详细步骤。结果1基因芯片结果发现髋关节软骨上调基因共246个。其中104个上调基因中的8个和142个下调基因中的8个被列为研究对象。WISP-2和PPARγ在DDH的早期表达变化提示WISP-2和PPARγ可能是DDH启动的重要因素。2番红O染色及大体测量及检测第8天的DDH组幼鼠髋臼和股骨头的大小明显减小,表现为浅髋臼,髋臼和股骨头的长轴和短轴均变短。番红O染色显示髋臼及股骨头软骨退化表现,细胞凋亡显著增加。

单因素分析显示 Rad-score(P<0.001)、CA-199(P=0.038)、术前 T分期(P=0.021)及EGFR(P=0.038)对区分训练组早期复发/转移与晚期复发/转移有统计学意义,多因素分析显示影像组学标签区分胃癌早期复发/转移与晚期复发/转移有统计学意义(P<0.00此网站1)。结论影像组学标签是区分胃癌早期复发/转移与晚期复发/转移的独立危险因素。早期复发/转移与晚期复发/转移的RS值存在明显差异。训练组区分早期复发/转移与晚期复发/转移的效能良好,验证组区分早期复发/转移与晚期复发/转移的效能欠佳。第三部分探讨影像组学标签在预测分子量胃癌术后无疾病生存期的价值目的探讨影像组学方法在预测胃癌术后无疾病生存期(DFS)中的价值。方法回顾性纳入179例(男性129例,女性50例)经病理确诊为胃腺癌的患者(规律随访>6个月),随机将其分为训练组(n=124)和验证组(n=55)。研究与DFS相关的临床购买CX-6258(年龄、性别等)、影像(肿瘤最大径、术前T分期、N分期等)及术后病理危险因素(VEGF、EGFR等)。通过LASSO回归筛选有效的纹理特征并组建影像组学标签,利用X-tile软件对影像组学标签值(Rad-score)进行处理,并将病人按照不同的复发/转移风险分组。以发生复发/转移为随访截止时间。分析影响DFS的危险因素,并对其进行亚组分析。

结论加味补中益气汤可以显著改善睾丸精子的发生及成熟,其可能的机制是通过调节小鼠精子线粒体功能(改善线粒体膜电位及超微结构)从而改善睾丸精子发生达到提高精子质量的目的。
来自3头公猪的混合精液(n=5)用于本次试验。试验用β-环糊精胆固醇包合物(CLC)作为冷冻保护剂,分对照组和0.75,1.5,3.0g/L CLC等3个试验组,检测冷休克及冻融精子的活力及线粒体膜电位。结果显示用CAhttps://www.selleck.cn/products/OSI-906.htmlSA分析,添加1.5g/L CLC的试验组精子活力显著好于其他试验组(P<0.05);利用JC-1对精子进行荧光染色分析,在4,17,-196℃下添加1.5g/L CLC的试验组精子线粒体膜电位显著高于对照组(P<0.05)。结果表明在稀释液中添加CLC能提高冻融后精子的活力和减少线粒体的损伤。
目的研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞活性、线粒体获悉更多膜电位,细胞色素C(Cyt C)及Caspase-3蛋白表达的影响与细胞凋亡的关系。方法以镰形棘豆总黄酮0.05、0.075、0.1g/L处理肝癌细胞SMMC-7721,24h后观察细胞的生长状况;镰形棘豆总黄酮作用于SMMC-7721细胞后,流式细胞仪检测细胞总体凋亡率和线粒体膜电位,Western blot检测对凋亡相关蛋白Cyt C及Caspase-3表达的AZD6244影响。结果结果表明,镰形棘豆总黄酮抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长,呈浓度依赖关系;镰形棘豆作用后可观察到凋亡细胞的比例升高;可导致细胞的线粒体跨膜电位明显降低,与药物浓度呈负相关。中、高剂量组的细胞中Cyt C及Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论镰形棘豆总黄酮诱导SMMC-7721细胞的凋亡可能是通过线粒体途径,并且与影响Cyt C及Caspase-3的表达有关。为镰形棘豆抗肿瘤的作用机制的实验和临床研究提供依据。

鉴于转移相关基因与胰腺癌恶性生物学行为和预后的相关性,鉴定胰腺癌中影响预后的转移相关基因,基于此建立预测胰腺癌预后的基因模型可能是开发更为精准的胰腺癌预后评估系统的有效策略。研究目的本部分研究的主要研究目的是应用转录组数据挖掘并结合临床和随访数据筛选胰腺癌中影响预后并呈差异表达的转移相关基因,基于此筛选关键基因,建立基因模型,并进一步整合预后相关的临床病理学参数,建立更优的Selleck胰腺癌预后评估系统。研究方法在本部分研究中,为了于胰腺癌基因芯片样本中得到可靠的、具有代表性的表达谱数据,首先,基于GEO数据库,我们下载并整合了四套胰腺癌基因芯片表达谱数据集GSE15471,GSE16515,GSE32676和GSE22780,并使用R语言对数据进行了一系列处理,鉴定胰腺癌中差异表达的基因。我们进一步从人类癌症转移基因数据库获取还有转移相关基因列表,分析他们在胰腺癌组织中的表达水平,与差异分析结果取交集,获得胰腺癌中差异表达的转移相关基因(DE-MTGs),并进行生物信息学分析。我们进一步在TCGA-PAAD数据库的胰腺导管腺癌患者队列中基于生存分析筛选预后相关的DE-MTGs,基于LASSO回归筛选关键基因,建立基因预测模型,计算风险评分。我们使用Xtile软件确定风险评分和的最佳介值将胰腺癌患者分为高风险组和低风险组。采用Kaplan-Meier生存分析中的log-rank检验,判断不同风险组间胰腺癌患者的总生存是否存在统计学差异。采用R语言软件包timeROC构建时间依赖的受试者工作特征曲线(ROC),确定曲线下面积(AUC),预测胰腺癌患者的1、2、3年的总生存率。并进一步计算一致性指数C-index,评估模型的预测效果。使用Delong等描述的方法判断不同预测模型的AUC间是否存在统计学差异。

胃腺癌是最常见的胃癌类型,90%以上的胃癌病例为胃腺癌。胃癌的病理特征受多种遗传和环境因素影响,胃腺癌也因此呈现出高度的形态学和分子异质性,而这种异质性阻碍了胃癌的精确诊断,对胃癌的临床治疗,全程管理,预后评估带来了一系列挑战。随着高通量测序技术的发展和肿瘤生物学现象的深入解析,从分子水平去解析胃癌异质性变得尤为重要selleck screening library。常规肿瘤块(bulk)测序由于检测的是基因的平均表达水平,掩盖了不同细胞群的特征,也因此无法分析组织内里的细胞多样性和细胞转录组状态异质性。另外,用已知抗体标记并纯化特定细胞群体的研究,无法涵盖所有细胞群体,并且无法检测稀有细胞群体或具有特定表型状态的细胞群体。因此,对于胃癌的异质性解析,迫切需要GS-7977半抑制浓度对胃癌前和恶性黏膜中单个细胞的表达进行全面而系统的分析。单细胞测序技术和微流控芯片技术的快速发展和联合应用使得研究者可以在单细胞分辨率下无偏颇,系统性的解析组织内的细胞组分和单个细胞的转录组特征。本研究拟采用这一高通量,高分辨率的转录组测序技术对胃正常组织,慢性胃炎胃黏膜组织和不同亚型胃癌黏膜组织进AZD3965购买行全面且系统的细胞和分子普查,以探索胃癌癌前化生细胞的起源和解析胃癌异质性。本研究纳入了3例非恶性胃黏膜(1例胃炎黏膜和2例胃正常黏膜),9例原发性胃腺癌的黏膜活检样本组织。将胃黏膜组织分成两等份,一部分经过解离消化成单细胞悬液用于分选活细胞进行单细胞测序,而另一部分则用于其他实验,包括EBER检测和免疫荧光检查。经过严格的数据质控,得到了超过27,677个单细胞的转录组图谱数据。